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厭氧培養箱具體使用步驟

日期:2018-05-07瀏覽:824次

       厭氧培養箱是一種在無氧環境下進行細菌培養及操作的專用裝置,可培養zui難生長的厭氧升物,又能避免以往厭氧生物在大氣操作時接觸氧氣而死亡的危險 。廣泛應用于醫學、免疫學、遺傳學、微生物、農業科學、藥物學的研究和生產,已經成為上述領域實驗室常用的儀器。我們在使用如何正確規范的操作厭氧培養箱呢,下面就做簡單介紹。

一、操作形成厭氧環境

1、調整混氮氣瓶、合氣瓶輸出壓力:調節減壓閥,使輸出壓力為0.1Mpa左右。
2、接通電源開關,開控溫儀,調節所需溫度,操作室里的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。
3、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內放入二個無毒塑料袋。
4、操作室內放入經過干燥過1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入厭氧指示劑(封閉)。
5、 關緊取樣室內外門,并抽真空校驗。
6、操作室內*次置換(氮氣置換):
(1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋。
(2)接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
(4)把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內,至全部放出。
7、操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,并注意隨時開閉排氣閥。
8、操作室第三次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為:N2 90%;H2 5%;CO2 5%)。
(1)調換氣路打開混合氣道通閥門進氣,充氣時要隨時開閉排氣閥。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣直通閥(三通閥)。
(3)把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
(4)通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。
9、操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后打開厭氧指示條觀察其變色狀況,變色為操作室內達到厭氧環境。
10、開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理。滅菌時間自定。

二、菌種的置入和培養

1、檢查取樣室內門并關緊之。
2、打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門。
3、 取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作。
4、如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5、取樣室內外門開啟,關緊要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)檢驗及幫助操作。
6、厭氧培養箱需要長期連續使用的條件:
(1)每天在操作室內觀察厭氧指示條,正常情況下可繼續使用。如不正常就必須重新換氣。
(2)要長期連續輸入微量的混合氣體,使補進的氫氣能和微量的氧結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3)連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
7、接種棒滅菌器的應用:
(1)隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉熔蠟。

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